Dépôt sur Membrane (Gridding)
Le spotting sur membranes ou MacroArraying est une technique qui permet de déposer un très grand nombre d'échantillons connus (oligos, bactéries, ADN, ..) depuis des microplaques 96 ou 384 puits, constituant une banque, sur une membrane de nylon.
Les échantillons sont déposés selon un ordre appelé pattern ou grid de façon répétitive sur la membrane. Des grids usuels (2x2, 3x3, 4x4, 5x5....) ou des grids spécifiques peuvent êtres utilisés.
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| Sélection d'un grid usuel 4x4 | Sélection d'un grid spécifique |
La technique utilisée est la capillarité: on trempe la pointe d'une aiguille calibrée dans le puit d'une microplaque et cette aiguille vient faire un spot au moment du contact sur la membrane.
On utilise des outils à 96 ou 384 aiguilles en fonction des formats des microplaques utilisées. Le format des membranes utilisé est généralement 22 x 22 cm mais il est possible d'utiliser le format 8 x 12 cm.
La densité des spots sur une membrane dépend du pattern, de l'outil et de la taille des aiguilles.
57 600 spots peuvent être déposés sur une membrane de 22 x 22 cm en utilisant un outil de 384 aiguilles (diamètre 400µm), un pattern de 5x5 sur 6 champs.
Les membranes sont ensuite hybridées et analysées avec un logiciel d'analyse d'images (par exemple ImaGene).
Les systèmes pour le dépôt sur membrane
QPix2
Le QPix de Genetix, est une station de paillasse modulaire. Il permet d'effectuer en autre des opérations de picking de colonies, la capacité en membrane est de 2 membranes 22 x 22 cm et 15 microplaques.
QPix2 XT
Le QPix2 XT de Genetix présente une excellente capacité de dépôt sur membranes avec la capacité de recevoir 6 filtres 22x22 cm ou 12 filtres 8x12 cm à la fois.
Les Consommables associés
Les Membranes
Nous proposons des membranes nylon neutre et chargé positif.
La membrane Performa II est idéale pour le dépot sur membrane automatisé, les Southern blots , dot blots... Haute sensibilité (jusqu'à 0.25pg d'ADN) et faible fluorescence intrinsèque.
Les Microplaques
Nos plaques conviennent à toutes vos applications de routine mais également à vos techniques spécialisées avec des plaques à fond en verre, plaques chimiquement résistantes, plaques faible volume, traitement culture cellulaire, possibilité de revêtement et sont compatibles avec votre équipement avec des plaques low profile ou format standard SBS.
Les boites bioassays (Qtrays)
Boîte de Pétri carrée avec couvercle et ergots de ventilation, transparente, stérile.
Dimensions: 24,2x24x2 cm.
Voir également
Nos réplicateurs pour une réplication manuelle de vos plaques
Nos systèmes pour le shearing d'ADN
Nos cellules compétentes
Fours à hybridation
